文章目录

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 FAdV-Fiber-2重组表达载体的构建及鉴定

1.3 重组蛋白FAdV-Fiber-2的表达

1.4 化学伴侣分子对重组蛋白FAdV-Fiber-2在大肠杆菌中可溶性表达的影响

1.5 重组蛋白免疫效果评价

1.6 检测方法

    1.6.1 目的蛋白含量测定

    1.6.2 不同表达蛋白的AGP分析

2 结果

2.1 FAdV-Fiber-2重组表达载体的构建及鉴定

2.2 重组蛋白FAdV-Fiber-2的表达

2.3 化学伴侣分子对重组蛋白FAdV-Fiber-2在大肠杆菌中可溶性表达的影响

2.6 疫苗免疫原性分析

3 讨论

4 结论

文章摘要:旨在解决大肠杆菌表达系统对禽腺病毒血清4型(FAdV-4) Fiber-2蛋白进行表达时存在的多包涵体问题。通过添加不同的化学伴侣分子来提升Fiber-2的可溶性表达量,并进一步通过动物试验评价蛋白的免疫原性。结果显示,添加化学伴侣分子β-环糊精显著提高了Fiber-2的可溶性表达量,且重组蛋白与FAdV-4阳性血清具有良好的反应性,琼脂扩散(AGP)效价达1∶128;以表达的可溶性Fiber-2蛋白作为抗原,制备油乳剂疫苗并免疫SPF鸡,通过AGP检测免疫后血清中针对FAdV的特异性抗体水平,结果Fiber-2蛋白疫苗及FAdV-4全病毒灭活疫苗于免疫后14 d,均可诱生特异性的AGP抗体。以上结果表明β-环糊精显著提高了Fiber-2的可溶性表达量,且免疫原性良好。本研究为FAdV-4亚单位疫苗的研制及产业化奠定了基础。

文章关键词:禽腺病毒血清4型,Fiber-2蛋白,化学伴侣分子,可溶性表达,免疫原性,

论文作者:张翼^1,2 刘鹏^1,2 

作者单位:1. 国家兽用药品工程技术研究中心 2. 普莱柯生物工程股份有限公司 

论文分类号: S852.4

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文章来源：《化学与生物工程》 网址: http://www.hxyswgc.cn/qikandaodu/2021/0818/1148.html