文章目录

1 材料与方法

1.1 材料

    1.1.1 菌株来源

    1.1.2 药物与试剂

1.2 方法

    1.2.1 药敏试验

    1.2.2 独立培养盐胁迫下耐药菌和敏感菌生长曲线的测定

    1.2.3 混合培养耐药大肠杆菌在盐胁迫下的相对适应性测定

    1.2.4 耐药基因检测

    1.2.5 外排泵与外膜孔道蛋白基因相对表达量测定

    1.2.6 数据处理

2 结 果

2.1 药敏试验结果

2.2 独立培养盐胁迫下耐药菌和敏感菌生长曲线的测定结果

2.3 混合培养耐药大肠杆菌在盐胁迫条件下相对适应性的测定

2.4 耐药基因检测结果

2.5 外排泵与外膜孔道蛋白基因相对表达量测定结果

3 讨 论

4 结 论

文章摘要:为了探究高渗对多重耐药菌外排泵和外膜孔道蛋白基因表达及其生长的影响,试验应用生长曲线和相对适应性测定,对比考察不同盐胁迫条件对多重耐药大肠杆菌QL15和敏感大肠杆菌ATCC 25922的生长差异,采用RT-PCR方法考察2种盐胁迫条件下外排泵与外膜孔道蛋白基因表达差异。结果表明,大肠杆菌QL15为高水平多重耐药菌,其中对大观霉素和恩诺沙星耐药最为严重,可达耐药标准MIC的32倍;独立培养时大肠杆菌QL15对NaCl胁迫的敏感性大于大肠杆菌ATCC 25922,并且在6.0%NaCl胁迫下,大肠杆菌QL15在10 h内生长缓慢,但是在24 h细菌峰值浓度更高;混合培养时大肠杆菌QL15在6.0%NaCl胁迫时具有更高的适应性,在体外培养中更具竞争优势。大肠杆菌QL15共携带5大类、15种耐药相关基因,其中含8种外排泵基因和3种外膜孔道蛋白基因;大肠杆菌ATCC 25922在6.0%NaCl浓度下的5种基因表达量较3.5%NaCl均出现约50%的显著下调(P<0.05),大肠杆菌QL15在6.0%NaCl浓度下除acrB、ompF基因下调外,其余3种外排泵与外膜孔道蛋白基因的表达量则显著上调(P<0.05)。推测大肠杆菌QL15对盐胁迫具有更高的适应性的原因可能与细胞膜相关蛋白的表达相关。

文章关键词:外排泵,外膜孔道蛋白,大肠杆菌,相对适应性,盐胁迫,

项目基金:国家自然科学基金项目(31760749),贵州省科技攻关计划项目(黔科合支撑[2018]2276);贵州省科技攻关计划项目(黔科合平台人才[2019]5615),《化学与生物工程》 网址: http://www.hxyswgc.cn/qikandaodu/2021/0909/1164.html